C18, C8, Phenyl, HILIC — 어떤 상황에 무엇을 쓰는지와 입자경·규격 선택 기준을 정리했습니다.
대부분의 분석은 C18에서 출발합니다. 잘 안 될 때 다른 상으로 옮깁니다.
| 고정상 | 극성 | 주 용도 | 특징 |
|---|---|---|---|
| C18 (ODS) | 무극성 (가장 강함) | 범용 역상 분석 — 의약품, 잔류농약, 첨가물 | 가장 널리 쓰임. 머무름 강해 분리능 우수 |
| C8 | 무극성 (중간) | C18에서 머무름이 과한 소수성 시료 | 분석 시간 단축. 피크가 늦게 나올 때 대안 |
| Phenyl | 무극성 + 방향족 | 방향족 화합물, 이성질체 분리 | π-π 상호작용으로 C18과 다른 선택성 |
| HILIC | 극성 | 당류, 아미노산, 극성 대사체 | 역상에서 머무르지 않는 극성 물질에 사용 |
| Amino / Cyano | 중간 극성 | 당·지질, 순상·역상 겸용 | 선택성 조절이 필요할 때 |
입자경은 장비 내압과 직결됩니다. 장비 사양을 먼저 확인하세요.
| 입자경 | 장비 | 특징 | 필요 필터 |
|---|---|---|---|
| 5 µm | 일반 HPLC | 내압 낮고 안정적. 기존 방법 이관에 적합 | 0.45 µm |
| 3 ~ 3.5 µm | 일반 HPLC | 분리능과 분석시간의 균형 | 0.45 µm |
| 1.7 ~ 2.7 µm | UHPLC | 분석시간 대폭 단축. 내압 높음 | 0.22 µm |
길수록 분리능↑ 분석시간↑. 성분이 겹치면 150~250mm, 빠른 정량은 50~100mm.
4.6mm가 표준. 2.1mm는 용매 사용량이 줄지만 LC-MS 등 저유량 장비에 적합.
본 컬럼 앞에 두어 오염을 막습니다. 컬럼 수명 연장에 비용 대비 효과가 큽니다.
미세 입자가 프릿을 막아 압력이 상승합니다. 시린지필터 여과는 필수입니다.
일반 실리카 기반은 pH 2~8. 벗어나면 고정상이 가수분해됩니다.
사용 후 물 → 유기용매 순으로 세척해 염 석출을 막아야 합니다.
현장에서 가장 많이 받는 질문입니다.
둘 다 역상 컬럼이지만 C18의 탄소 사슬이 더 길어 머무름이 강합니다. C18에서 피크가 너무 늦게 나오거나 분석 시간이 길면 C8로 바꿔 시간을 줄일 수 있습니다.
장비에는 장착되지만 UHPLC의 장점인 분리능과 속도를 살리지 못합니다. 반대로 일반 HPLC에 2µm 컬럼을 쓰면 내압 한계를 넘을 수 있어 장비 사양 확인이 필요합니다.
대부분 시료 여과 누락으로 인한 프릿 막힘이나 버퍼 염 석출입니다. 시린지필터 여과 여부와 세척 절차를 먼저 점검해 보시기 바랍니다.
네, 분석 대상 물질과 사용 장비, 기존 방법을 알려주시면 적합한 컬럼을 함께 검토해 제안해 드립니다.
